? asked in 科學生物學 · 1 decade ago

DNA end labeling 和 internal

DNA end labeling為何要用γ-dATP ?

DNA internal labeling為何要用α-dATP ?

為什麼呢?

1 Answer

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  • 1 decade ago
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    不好意思,版主所謂的DNA end labeling是指在5'端的end嗎?

    如果是指5'端,這就很好解釋。

    在ATP的結構上,P所在的位置,可以稱為α、β、γ。離五碳醣最近的那個P,就叫α,第二個當然叫 β,最遠的那個當然叫γ。因此當我們去用32P標記在dATP(其實說dNTPs也可以啦),如果32P所在的位置在α,那就是α-dATP;32P在β,就是β-dATP;32P在γ,當然就是γ-dATP了。

    在DNA合成中,所使用的NTPs(ATP、CTP、GTP、TTP),在聚合的過程中,β和γ都會斷裂,只留下α的P和另一個NTPs相鍊結(NTP→NMP)。為一例外的就是在5'-end的那個NTP。只有那個NTP在反應中那三個P不參與作用而獲得保存。

    因此在進行DNA end labeling的過程中,會使用γ-dNTP,因為那個P不參與反應而獲得保存,所觀察到的訊號確定是在一端的訊號;而在 DNA internal labeling的過程中,僅有α的32P保存,當然使用α-dNTP了。

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