Anonymous
Anonymous asked in 教育與參考其他:教育 · 1 decade ago

western blot 血液如何前處理?

想要請問各位實驗高手

假若western blot要做人類血液的話

要做如何的前處理呢?

那是要用全血去做?或是RBC就行了?

那假若要跑PCR 又要如何處理呢??

請大家幫幫我吧!

都碩二下期中了~壞心的教授才說要做western blot和PCR

我想~我無法如期畢業了~

可悲的研究所黑心文化

只因學生斷層 沒人接手 就用各種理由不讓學生畢業

我想她們會得到她們應得的~~報應

但為了要畢業 也只能忍氣吞聲了

拜託大家了

Update:

再請教一下

您說的血球梯度濃度離心

是可以將紅血球 白血球 淋巴球...等 分離嗎??

紅血球分離出來後 白血球分離出來後要再做什麼處理呢??

您說的那PCR處理Kit

老師應該不會買 因為他沒有案子 所以沒有經費可買

所以 如果沒用那Kit的話??

要如何處理??

2 Answers

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  • VBC
    Lv 7
    1 decade ago
    Favorite Answer

    要做western blot前,必須先知道您要研究的蛋白質是在血清或血球中。若需取的是血清,採血時建議應用較大口徑的針頭,取樣後立刻離心3000g, 30min分離血球與血清。取上層血清進行蛋白質純化。

    若所需的蛋白質在血球內,則以梯度濃度離心(蔗糖或氯化銫)分離血球。

    而以血液作PCR實驗就很簡單了。只要有適當的primer,利用市售的 血液direct PCR試劑 ,只要1μl的全血,不需任何處理就可以做PCR。

    Phusion Blood Direct PCR Kit

    ============

    現在景氣不好,畢業即失業的狀況很多。在學校多多充實技術也是不錯,免得找工作時技術經驗不足。像western blot,PCR這些都是分子生物的基本工具;即時是將來要找助理或生技公司等職缺都必須要會,趁這半年趕快多學學吧。我現在都工作五,六年了還覺得當初在研究所實驗學的不夠多。

  • Anonymous
    6 years ago

    到下面的網址看看吧

    ▶▶http://qoozoo09260.pixnet.net/blog

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