小妞 asked in 科學化學 · 1 decade ago

Southern與Northern方法其應用價值差異?

Southern blotting與Northern blotting方法及其應用價值之差異??

謝謝~

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  • 1 decade ago
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    南方墨點法

    此方法的命名源自其發明者生物學家Edwin Southern。南方墨點法(墨點或稱印跡)是探測一個DNA樣品中含有特定DNA序列的方法。首先,DNA樣品為凝膠電泳所分離;然後,分離的樣品通過毛細現象被轉移到一張膜上,這一過程被稱為「印跡」(blotting)。帶有樣品的膜就可以用與目標序列互補的標記的DNA標記探針來探測。最初的操作手冊大都採用放射性標記,但現在非放射性標記已開始被採用。自從PCR技術被用於檢測特定DNA序列後,Southern印跡法在實驗室中的應用大為減少。但此方法依然有著其他一些應用,如用於測量轉基因鼠的轉基因拷貝數,以及用於構建基因敲除的胚胎幹細胞系。

    北方墨點法

    北方墨點法被用於研究特定類別的RNA分子的表達模式(豐度和大小)。與南方墨點法相似,RNA樣品為凝膠電泳按大小分離;然後轉移到膜上,並用與目標序列互補的標記的探針來探測。實驗結果可以根據所用探針的不同以多種方式來觀察,但大多數都顯示的是樣品中被探測的RNA條帶的相對位置,也就是分子大小;而條帶的強度則與樣品中目標RNA的含量相關。這一方法可以測量目標RNA在不同樣品中的情況,因此已經被普遍用於研究特定基因在生物體中表達的時刻和表達量,也是這類研究中最基本的手段。

    除了南方墨點法的命名是來自於發明者的姓名,其他墨點法的命名則都是源於發明者的幽默:因為南方(Southern)既是墨點法的發明者Edwin Southern的姓,同時其英文含義為「南方」;於是隨後發明不同印跡法的研究者們紛紛將這些方法以方位命名。

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