o.o asked in 科學動物學 · 1 decade ago

如何identify一個基因

如何去identify一個基因呢? 如果identify出來之後要如何去研究其功能呢?

Update:

目前已知要從cDNA中找出已知的基因,從MICROARRAY或許是個最快的方法,但是如果是要從cDNA中去尋找未知的基因,要如何設計這個實驗呢?

4 Answers

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  • 1 decade ago
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    一個基因在能被使用來進行基因操作之前..必須先能分離出來並經過完整的鑑定分析。分離出我們感興趣的DNA並擴增DNA含量..此方法稱之為基因選殖..

    其方式乃經由將此基因插入當做載體或媒介的DNA分子中。當兩個不同來源的DNA分子被組合後..就產生了重組DNA分子。這個分子將被移入宿主細胞中..如:大腸桿菌..在細胞中..這些分子會被增殖。當宿主細胞分裂時..在菌落中的每個細胞或是殖株都會含有拷貝出來的一個或多個相同的重組DNA分子。於是存在於重組DNA中的這段DNA就已經被選殖出來了。

    基因選殖具有許多的用途..其中一部份為:DNA可以在宿主細胞中增殖以得到許多的拷貝來做進一步的研究..一個基因經過表現後可以得到有價值的蛋白質產物..且基因和他的表現相關研究可以在活細胞中進行。

    DNA剪切(接合)--利用酵素

    V

    DNA限制片段的分離與觀察--瓊脂醣凝膠電泳(根據分子大小來分離DNA片段)

    V

    DNA選殖--每個步驟使用的特殊方法依照使用不同形式的DNA..宿主細胞的種類和基因選殖主要的目的而有所不同

    V

    選殖載體

    V

    細胞轉形

    V

    基因庫的建構與篩選

    Source(s): 生物科技概論
  • 1 decade ago

    首先對上面的大大抱歉 因為最近電腦壞了 沒辦法上來票選最佳解答 所以造成無法給點數 很是抱歉~~~

    或許是說要從一段序列中去尋找是否這段序列中是否有隱藏未知基因比較適合這個題目,而要從一堆cDNA中去尋找基因,最方便的當然是從參考用的NCBI去設計PRIMER來夾出已知基因,但是對於一段序列中是否藏有基因呢?可能就是像P大說的利用一些RULERS去尋找,如尋找ORF或是比對DOMAIN之類的生物資訊作初步探索,找出的未知基因是否在其他動物也有,可能就要利用zoo blot等方式去探索了,至於研究基因等功能就如大大們所說的要knock down之類的方法繼續往下探討了.

  • ?
    Lv 6
    1 decade ago

    如果單單是用knockout的方式去做gene annotation的話

    光是E coli就搞死做實驗的人了

    用cDNA中去尋找未知的基因?

    cDNA不就是表現的基因嗎?

    可以用bioinformatic analysis去註解可能的基因在什麼位置

    像是利用已知的rules去進行註解

    2008-04-06 03:04:22 補充:

    NCBI的database中不知道多少是annotate出來的資料

    然後我們再用別人註解的去做wet lab實驗

    一整個很瞎

  • 1 decade ago

    基本上

    要研究基因功能的話

    大多先採取破壞的方式

    例如說knockout

    觀察哪些功能喪失之後以此來判斷

    2008-04-03 17:43:03 補充:

    那要看這個基因「未知」到什麼程度

    如果說他在別的物種已經知道序列,那麼就以其他物種的序列來比對出相似區域,並以這些區域來設計引子,最後進行RACE來取得全長。

    如果這是一個全新的基因,那就要看你們當初到底是怎麼樣得到這個基因

    如果是以DNA隨機插入造成的基因knockout,其實就可以根據送入的DNA片段來向外進行增幅取得基因序列。

    總之我也不知道實際狀況是怎麼樣,所以也是很難講

    2008-04-03 21:40:31 補充:

    所有的設計都需要有條件

    knockout有knockout需要的條件,anno有anno需要的

    當然沒有人會笨到一個一個去做

    annotation其實具有相當的危險性,因為database當中的錯誤不在少數

    總而言之,在沒有了解狀況之前,一切的猜測都是可能的

    除此之外,以 polyT 作成的cDNA libary中當然是可能具有未知基因的

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