no_nickname asked in 科學化學 · 1 decade ago

(電泳槽)洋菜膠孔洞大小是不是和洋菜膠有沒有凝固完全有關??

1.請問當把齒疏從鑄膠槽拿出來後,膠上面的孔洞不太明顯

是不是因為膠沒有凝固完全??

2.膠容不容易凝固主要是看"當初洋菜膠溶液配的濃度"還是說"TAE溶液的濃度"???

另外我想請教一下:

3.我們洋菜膠凝固以後是要先放在電泳槽加TAE溶液蓋過gel的孔洞,再把DNA樣品分別放入那幾個GEL的孔洞

還是說要先把DNA樣品放入gel的孔洞,再加TAE溶液蓋過gel孔洞??

4.Gel loading buffer裡面包含什麼?其容量分別要加多少??

Update:

第4個回答裡面的

Gel loading buffer 裡面ㄉ"6× "代表什麼???

Update 2:

第4個回答裡面的

6×Gel loading buffer 裡面ㄉ"6× "代表什麼???

glycerol 是什麼???

Update 3:

0.25% bromophenol blue及30%甘油 體積要幾比幾???

是混合後注入凹槽ㄇ???

1 Answer

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  • Anonymous
    1 decade ago
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    1. 可能你的膠濃度太稀 膠太軟 所以孔洞不明顯

    2. 應該是洋菜的濃度太低 一般溫度低於50度膠就會凝固

    即使用純水也是會凝固

    3. 最好先把TAE 蓋過孔洞 再加樣品

    雖然 先加樣品也可以 但是 樣品量太少的話 會出現多條BANDS

    4. gel-loading buffer [0.25% bromophenol blue與50% glycerol]

    6× Gel loading buffer(內含0.25% bromophenol blue及30%甘油溶於水中), ^_^

    通常 用1/10 就可以 也有人用 1/6

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