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阿昌 asked in 科學植物學 · 1 decade ago

破壞細胞壁 但 細胞模內部要完整 20點!!

要用什麼方法

能保護細胞模 同時又能 破壞細胞壁

生物領域的專家們

幫忙一下 拜託!!!

有哪些 "比較" 容易的做法

告訴一下

拜託一下

謝謝

Update:

ΓΝΟΣΙΣ ⊕ ΣΟΦΙΑ:

我要把植物的葉綠素 給破壞掉

做科展要用的

請麻煩擬再說詳細一點吧

Update 2:

ΓΝΟΣΙΣ ⊕ ΣΟΦΙ:

不好意思唷!!植物的細胞壁破壞掉

但是細胞膜裡面的東西要完整的

ㄚ堯:同上,"破壞"細胞壁,不好意思 上面的補充打錯了,可以再詳細一點嗎??

謝謝你們兩位^^

4 Answers

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  • 1 decade ago
    Favorite Answer

    Plant Total DNA Isolation

    Procedure

    1. Preheat the CTAB isolation buffer at 60Co.

    2. Grind 2 g of fresh, leaf tissue to a powder in liquid nitrogen in

    a chilled mortar and pestle.

    3. Scrape the powder into a tube.

    4. Add 2 ml CTAB buffer per gram of tissue to the tube.

    5. Incubate the sample at 60Co for 30 min with occasional gentle

    swirling and invert tubes periodically during incubation.

    以上是植物細胞DNA萃取的部份流程

    這個流程中是以破壞細胞壁但不破壞細胞膜為目的

    你參考看看

    大意是

    1.將CTAB放置在60度C恆溫箱下預熱

    2.取2g葉組織加液態氮研磨成粉末狀

    3.之後每克的葉組織加入2ml的CTAB

    4.將混和物放在60度C恆溫箱反應30分鐘

    5.完成細胞壁分解

    藥劑詳目

    CTAB Isolation Buffer (pre-heated to 60Co)

    配法

    1.4 M NaCl

    100 mM Tris-HCl, pH 8.0

    20 mM EDTA (use 0.5M pH 8.0 stock)

    2% (w/v) Ethyltrimethylammonium Bromide (CTAB)

    0.2% (v/v) 2-Mercaptoethanol

    建議:

    我不確定你們實驗室的設備如何

    如果缺乏上述器材藥劑

    可以到臨近大學的生命科學相關系所拜訪求助

    依需求修正實驗流程:

    葉組織在研磨時,不建議過度研磨

    因為你希望有完整細胞

    所以實驗過程中

    葉組織稍微壓脆即可、用力壓扁的話會擠出細胞質破掉

    加液態氮弄脆到米粒大小就可

    沒有液態氮的話,把葉組織剪碎也行

    然後加CTAB下去後

    反應時間盡可能延長(數小時都行)

    理想分解完全後

    不會看到有大型顆粒物

    只剩一片綠色液體

    2007-10-16 11:01:49 補充:

    有其他疑問MSN密我

    會員資料中有

    Source(s): 生物技術實驗資料
    • Commenter avatarLogin to reply the answers
  • Anonymous
    6 years ago

    瞭解一次、多一次的保障。尋找八大行業工作。必須謹慎小心一點。

    小巴常說:保險跟冒險只差一個字,意義卻是大不同!

    一通電話、一次詢問。都是為自己的著想。

    • Commenter avatarLogin to reply the answers
  • 1 decade ago

    ㄝ~~我想你的問題就有問題鷗!!

    你是要破壞葉綠素還是細胞壁

    1.如果是細胞壁的話,你只要將葉片切碎,放到加有cellulase的等張溶液中六七小時即可,等張溶液的鹽濃度(依不同植物有所不同)很重要,如果沒有調好,細胞壁ㄧ被破壞細胞也會死掉,

    2.如果只是要破壞葉綠素那就簡單了,用液態氮把植物磨碎,然後加入非等張溶液就搞定了

    Source(s): 自己 and 基礎分子生物學
    • Commenter avatarLogin to reply the answers
  • 植物細胞壁主要是纖維素,果膠等,有些含有較多的木質素;細菌細胞壁含有肽聚醣等纖維素。這兩大類分別找適當的東西 (酵素 = 酶) 來溶掉就可以了。

    像植物可以用纖維素酶等。細菌可以用溶菌酶。不同的生物細胞壁的主成分不同,要分別用不同的化學物質處理。

    如果買不到藥品,也可以用天然的東西,像蝸牛的分泌物或牛的瘤胃真菌。人的口水也有一些溶菌酶。

    2007-10-15 21:09:38 補充:

    描述有點混亂也, 是要把細胞打破但是細胞膜要留下來嗎?

    那樣在顯微鏡下把它穿破就好了.

    2007-10-15 23:37:37 補充:

    只溶去細胞壁的話找到適當的分解酵素就好了.

    但是問題是細胞膜與胞器要完整, 還要從中破壞葉綠素嗎?

    • Commenter avatarLogin to reply the answers
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