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比較yeast vector

請比較yeast vector中2mm plasmid 和 centromere plasmids 作為 gene

transfection 時的優點...

2 Answers

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  • 陳皓
    Lv 6
    1 decade ago
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    2 mm plasmid應改為 2 μplasmid。

    酵母菌載體 (Yeast vector) 依其能否獨立複製 (是否具有複製序列),分為:

    一、Integrating vector:無法自行獨立複製。

    載體不具複製序列,必須嵌入酵母菌的染色體內才能隨著細胞分裂時複製。

    純粹是基因選殖時,製備 gene library時使用。

    二、Replicating vector:具有複製相關的序列,依其複製序列種類分為:

    (1) 2 μplasmid:從酵母菌天然的質體上截取一段包含複製序列的 2μDNA。

    其優點是非常穩定,可確保細胞分裂時,質體的性狀可移交到子代中不會遺失。

    而且是 high-copy number的質體。

    (2) ARS plasmid:從酵母菌的染色體中截取一段ARS element,

    ARS是表示Autonomously replicating sequence。

    ARS-containing plasmid的穩定性較差,質體常被分解而無法代代相傳 。

    但是若加入一段centromere (CEN) sequence (稱CEN plasmid),就可使質體穩定性提高。

    但是其copy number較低,一般僅為 single copy。

    因此要選擇 2 μplasmid或 CEN plasmid依實驗者所需的 copy number而定,

    Copy number 的多寡常會影響訊息表現的程度,因此:

    若是希望看到插入 DNA於轉形酵母菌中大量表現,就會使用 2 μ plasmid;

    若是希望插入DNA的表現處於正常生理的常態,就會用CEN plasmid。

    另外,還有一種CEN plasmid (只要載體上有CEN 序列,即是CEN plasmid)

    就是YAC (yeast artificial chromosome),這種線形載體除了上述ARS, CEN序列外,

    兩端再加上telomere序列,形成彷彿就是染色體般的外觀,故名之。

    其特性是容量 (capacity) 超大,可承載 0.2~2.0 Mb DNA的長度。

    一般 gene cloning 較不使用,

    較被用於genomic library的建構或分析較大基因組的特性時使用。

    Dr. 陳皓

    Source(s): www.e-biolearning.com (E-流生化教育網版權所有)
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  • A姐
    Lv 5
    1 decade ago

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