細菌生化檢驗流程

有人可以提供細菌生化檢驗流程的詳細資料..或是網站..圖片也行

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  • 黑輪
    Lv 6
    1 decade ago
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    細菌生化學的性狀   

    1. 觸試驗 (Catalase test )

      以一置 37℃ 培養 18~24 小時的瓊脂斜面培養 * 加入 1ml 的 3% H2O2,將試管傾斜,如很快產生氣泡即屬陽性反應;Micrococci 及 Staphylococci 皆 Catalase 陽性:Streptococci 及 Pheumococci 為陰性。Bacillus 菌種亦為 Catalase 陽性。

      此試驗亦可用經 24~48 小時培養的肉湯或 thioglycollate 培養基 ( 微嗜氧性及厭氧性菌 ) 加入 1ml H2O2 再觀察氣體發生情形。此種試驗不能在 Blood agar plate 上施行,因紅血球內含有 Catalase 。

    * 斜面培養需接種大量細菌,時間過久的培養不適於本試驗。

    2. 硝酸鹽還原試驗 (Nitrate reduction test)

    如有亞硝酸鹽存在,則在一兩分鐘內可見紅色發生此為陽性反應。有些細菌可把硝酸還原成氮或氨,是以此時即呈陰性反應,故若不先察看有無未還原的硝酸鹽存在與否,則不可報告此試驗為陰性,如還原試驗陰性時可加極少量的鋅粉於已試驗為陰性之培養基內,如有未被還原的硝酸鹽存在則可見呈紅色,如此才能肯定此試驗為陰性,又此試驗需在 37℃,經 24到 48 小時培養之後再做。

    3. 色素之原還:如美藍、中性紅、Litmus 等。

    4. 糖類之分解: (字太多不在此說明)

    5. 乙醯甲基羰試驗 Voges-Proskauer (acetyl methylcarbinol test)

    如有 acetylmethylacarbinol 產生,在表面上可見鮮明的紅色然後漸及整個肉湯管。

    6. 甲基紅試驗(Methyl red test )

    於 5ml MR-VP 肉湯培養菌液中,加入 5 滴 methyl red 溶液,如有酸產生,可見明顯的紅色,此為陽性反應。陰性反應則呈黃色。

    Escherichia coli 及其他 methyl red 陽性的細菌會在此種培養基內分解葡萄糖而產生酸,故指示劑變紅色。試劑之配製以 methyl red 0.1gm 溶於 300ml 的 95% 酒精,再以蒸餾水稀釋至 500ml。

    7. 對蛋白質或氨基酸之作用及其他有關試驗

    a. 硫化氫產生試驗 (Hydrogen Sulfide Production )。把細菌接種於含硫液體培養基,在塞子和管內壁間插入一張醋酸鉛紙條 ( 不要接觸到液體 ),硫化氫產生則紙條下部份會變黑色。

    註: 因此試驗相當靈敏,故在 TSI agar 的底部反應是陰性或微陽性時,此酸鉛紙條試驗則呈陰性。

    (b) Triple sugar iron (TSI) agar method ( 三糖鐵瓊脂試驗法 ):把細菌接種於 TSI 培養基底部 (butt),硫化氫之產生可由 butt 變黑察知,亦可放醋酸鉛紙條於塞子和管內壁試驗之。

    b. Gluconate oxidation test

    Pseudomonas aeruginosa 能夠把葡萄糖或 gluconate 氧化成 ketogluconate ,此物能還原銅鹽 (Benedict 氏溶液中之銅鹽 ),故此法可鑑定不產生顏色的 Ps. Aeruginosa。

    試驗時以一片 gluconate substrate 加於 1ml 蒸餾水中,大量接種細菌,置於 37℃ 培養 12-18 小時,隨後以培養菌用 Benedict 氏溶液來試驗,如有還原作用 ( 陽性反應 ),則顏色由藍色變為黃綠色。

    c. Neisseria 氧化試驗 (Oxidase test )

      此液需立即使用,因只在 1-2 小時內有效,對疑似 Neisseria 菌落滴加幾滴試藥,菌落產生 Oxidase 時則先呈粉紅色,繼轉變成紅色最後變為黑色。粉紅色的菌落尚可活,但顏色變黑色,則已死亡。又此試藥不會影響 Gram 染色反應。

      

    8. Oxidase test for Pseudomonas

    試驗:

      染料溶於水沖,靜置 15 分鐘後使用,每次用時應重新配製,此液 2 小時內有效,在 Whatman No.1 濾紙(6 公分)滴 2、3 滴試藥,取少許可疑菌落置於藥紙上,以白金耳線塗抹之,Oxidase 陽性者在 5~10 秒間即呈暗紫色。

      * Para-aminodimethylaniline monohydrochloride 可替代之。

    還有其他已經寫不下了就這樣

    Source(s): 呂榮修‧蔡同榮之細菌之同定
  • 1 decade ago

    http://moris.csie.ncku.edu.tw/pathology/query/inde...

    這是檢驗網址 你看看吧.....不知能不能幫上你的忙^^"

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