Anonymous
Anonymous asked in 遊戲與休閒活動其他:遊戲與休閒活動 · 2 decades ago

酵母菌要怎麼養?

我正在養殖可以吃的酵母菌

可是嘗試很多次都不是很成功

很多人說我的養殖方式不正確

可以告訴我養殖酵母菌有什麼特別撇步嗎?

3 Answers

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  • Anonymous
    2 decades ago
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    以下是自己培養之方式養細菌或酵母菌(yeast)其培養基必須提供下列幾種基本的營養條件:(1)碳源作為能源(2)水分(3)氮源(4)磷(5)硫(6)不同的礦物質養分,如鐵和鎂。大腸桿菌和酵母菌能在只有一種碳源(如葡萄糖)與簡單的氮源(如氯化銨、硫化銨及磷、硫等礦物質)的簡單培養基中生長,酵母菌則還需要幾種維生素。實驗研究上常用到一些複雜的培養基,其主要成分則由複雜的養分(包括植物或動物)所提供的一些不詳萃取物。例如LB和YPD培養液,其主要成分是酵母菌萃取物(yeast extract)和蛋白月柬(peptone,一種水解的蛋白質)所組成,這些材料和胺基酸以及不明的輔助因子混合在一起,如維生素等形式提供不同的碳源和氮化合物。液體培養基就是將各成分溶於水中即可,若加入洋菜(agar,從紅藻中萃取出來的複雜萃取物,與洋菜膠agarose不同,請勿用錯)則成固體培養基。洋菜是固體微生物培養基理想的凝固劑,因它具有良好的溶解特性,但對大部分細菌及酵母菌而言則不具營養價值。固體洋菜在90~100 °C會溶解,液體洋菜在約42 °C時凝固。滅菌步驟可去除所有活的微生物,培養基在做純系培養時必須將所有的微生物去除,培養容器則要密封或用棉花、錫箔蓋住以避免滅菌後又遭污染。純系培養過程中所用的液體及容器可用不同的方法消毒,包括高溫、放射線照射、過濾等將微生物殺死。製備培養基常需要高壓滅菌鍋(autoclave),讓培養基在特定時間內暴露於高溫高壓中,通常是121 °C的高溫,蒸汽壓15 Psi,滅菌20分鐘。2.儀器用具:a. 高壓滅菌鍋(autoclave)b. 磁性攪拌器c. 天秤d. pH metere. 水浴槽f. 無菌操作台3.藥品及試劑:a. Tryptone(代替peptone)b. yeast extractc. NaCld. Agare. ampicillin4.方法步驟:區分數組各製備不同的培養液或培養基。(A)LB培養液:1)在500ml錐形瓶中加入1 g tryptone + 0.5 g yeast extract + 1 g NaCl,加水至100 ml刻度並用磁性攪拌器混勻,瓶口以鋁箔紙蓋住。若用玻瓶裝,則旋鬆蓋口(待滅菌後降溫再旋緊)。2)高溫滅菌鍋消毒。註:高壓滅菌後必須等它慢慢排氣,只有當氣體完全排除後,才能安全地打開滅菌鍋,戴耐熱手套取出材料,消毒20分鐘實際需要約40分鐘,因為還要把空間加熱及排氣時間包括在內。(B)LB固體培養基:1)在500 ml錐形瓶中加入1 g tryptone + 0.5 g yeast extract + 1 g NaCl + 1.5 g agar,加水至100 ml刻度並用磁性攪拌器混合,agar此時無法溶解成懸浮狀,瓶口以鋁箔紙蓋住。2)高溫滅菌鍋消毒。3)滅菌後,小心將瓶放在50 °C水浴中,使其降溫30分鐘。4)在培養基凝固前,倒入微生物用的培養皿(petri dish),置於抽風櫃中,以防污染,待完全凝固後,蓋緊蓋子標明"LB plate"及日期,放在室溫或4 °C中備用。(C)Ampicillin plate:1)如同前項(B)步驟1)至3)。2)在培養基凝固前,迅速加入ampicillin使成最終濃度為100 mg/ml,搖晃均勻,倒入微生物用的培養皿(petri dish),置於抽風櫃中,以防污染,待完全凝固後,蓋緊蓋子標明"Amp plate"及日期,放在室溫或4°C中備用。(D)YPD培養液:1) 在250 ml錐形瓶中加入1 g tryptone + 0.5 g yeast extract,加水至50 ml刻度並用磁性攪拌器混勻,瓶口以鋁箔紙蓋住。2)高壓滅菌消毒。3)冷卻至55 °C,加入葡萄糖溶液成最終濃度為2%。(E)YPD培養基:1)在250 ml錐形瓶中加入1 g tryptone + 0.5 g yeast extract + 1 g agar,加水至50 ml刻度並用磁性攪拌器混勻,瓶口以鋁箔紙蓋住。2)高壓滅菌消毒。3)冷卻至55 °C,加入葡萄糖溶液成最終濃度為2%。4)倒入微生物用的培養皿(petri dish),置於抽風櫃中,以防污染,待完全凝固後,蓋緊蓋子標明"YPD plate"及日期,放在室溫或4 °C中備用。(A)單一菌落(single colony)之分離:1.利用微生物的生物技術作純系(pure line)的保存,常依據純系培養,常見的有稀釋技術或畫線法,本實驗將介紹後者,乃在培養基表面把混合培養的菌塗開或畫成線,讓個別的細胞分開。每個分離的細胞會長成一個菌落(colony),可獲得一個純系培養。2.儀器用具:a. 37 °C恆溫箱b. 酒精燈c. 接種環3.藥品及試劑:a. E.coli菌株:DH5ab. LB及LB plate4.方法步驟:1)前一天,自-70 °C取出儲存的菌種,培養在LB培養液中並置於37 °C恆溫箱中振盪培養過夜。2)每組取1個LB plate,在培養皿底部標明組別、日期及"DH5a"。3)將接種環在酒精燈焰上燒紅,環上方部分亦以火焰燒過,將接種環在空白LB plate處輕戳數次以使冷卻。4)取過夜菌液,將接種環浸一下。(若為培養基,則輕刮一個菌落)。5)打開空白LB plate,將沾有菌落的接種環在其上輕輕連畫數條橫線,唯再次畫前需將接種環重覆火焰滅菌的步驟。(B)菌落的移殖接種(inoculation)技術1.生物技術學者均需利用無菌技術,小心操作,才能避免在移殖接種中被不想要的微生物污染。2.儀器用具:同上3.藥品及試劑:同上4.方法步驟:基本上同前,唯一差別是接種於LB broth中。IV.菌種保存1.菌種保存於15% glycerol(甘油)中,可保存在低溫(-70 °C)中數月甚至數年。2.儀器用具:a. 37 °C恆溫箱b. –70 °C冰櫃3.藥品及試劑:a. 50% glycerol (autoclaved)b. 2 ml vial螺旋式保存管4.方法步驟:1)於無菌操作台中,將長至mid-log phase之菌液取出700 ml置於2 ml螺旋式保存管中。2)加入300 ml 50 % glycerol混合均勻。3)標示菌種名稱及日期,置於-70°C冰櫃中保存。V.生長曲線1.分子生物學中無論是進行勝任細胞的製備,或獲得可重覆生產之質體DNA及生產重組蛋白質,都必須先瞭解生物之生長特性。若要獲得生長均一的菌類,就必須取對數生長期或指數期的菌類,此時族群中每個細胞之生長速度和成分接近相同。不同培養基依其營養條件及通風情形(氧氣)的良好與否,其生長曲線多少會有變化。基本上生長過程包括了呆滯期(lag phase)、對數期(exponential or log phase)、停滯期(stationary phase)和死亡期(death phase)。2.儀器用具:a. 37 °C恆溫箱b. spectrophotometerc. 酒精燈d. 接種環3.材料:E.coli菌株: DH5a4.方法與步驟:1)測量生長曲線前一天,自-70 °C取出儲存的菌種,培養在LB培養液中並置於37 °C恆溫箱中振盪培養過夜。2)各組準備10 ml LB培養液,加入50 ml過夜菌液,置於37 °C振盪培養。3)接種1小時後,每隔30分鐘取少量菌液測其OD600值,background為LB培養液。4)以橫軸為時間,縱軸為細菌數目取對數(log)做圖,畫出DH5a的生長曲線。註:1個OD600值約含8´108個細菌轉載(基本操作技術)

    Source(s): 知識+
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  • 1 decade ago

    去食工所阿 不然就是去買酵母粉 你是要幹麻的?

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  • ALVIN
    Lv 5
    2 decades ago

    請問酵母菌要去那裡買呢?

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