章魚
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章魚 asked in 科學生物學 · 2 decades ago

哪一種實驗證明DNA複製時是採半保留方式進行?

1958年,哪一種實驗

證明DNA複製時是採半保留方式進行?

3 Answers

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  • Anonymous
    2 decades ago
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    你是問哪種實驗吧

    --->The Mselson-Stahl experiment

    他們用N-15和N-14去染E.Coli bacteria

    然後讓細菌複製

    看試管中的分層

    來證明出半保留複製

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  • 2 decades ago

    1957年,梅瑟生(Matthew Meselson)與史達(Franklin Stahl)的實驗證明了半保留型複製是正確的模式。

    這種實驗必須能區分新合成的與舊的DNA鏈,他們設計了一種可以區別舊股和新股的方法,關鍵在於使用兩種無放射性的同位素N15與C13分別做標幟。用重的N15與C13標識的DNA比重比正常的含N14及C12的DNA要高。但是要用什麼溶液來區分比重不同的DNA呢?他們想到用一種「密度梯度離心」(density gradient centrifugation)的方法。他們找到Cs這重金屬。Cs+離子在水中會下沈,但是它也會擴散。如果擴散速度接近或大於下沈速度,就等於沒有下沈現象(雲是否也是這樣?)。如果施以高速離心,加速Cs+下沈速度,超過擴散速度,Cs+會部分下沉形成一個濃度的梯度(gradient),也就是密度的梯度。當DNA溶解於適當濃度的CsCl水溶液中,並以高速離心(如100,000g),則DNA會跑到離心管中某一相 當於它比重的位置,形成一個帶狀。在這一位置中,CsCl溶液的密度等於DNA的密度,大約為1.7(在同一溶液中 ,蛋白質的密度約為1.6,RNA的密度大約為1.8)。利用這個原理,他們用15N和13C培養基培養細菌數代之後,再將這些細菌放在一般含有14N和12C的培養基上,收集第一次分裂所產生的子代和經過第二次分裂所產生的子代。將DNA抽出來,用密度梯度分析。原本在有15N及13C中培養的細菌DNA最重(15N13C /15N13C)。在N14及C12中養 過一代的DNA密度居中(14N12C /15N13C),原來的(15N13C /15N13C)不見了。再過一代之後,則出現兩種密度, 除了一個居中(14N12C /15N13C),又有一個更輕的(14N12C /14N12C)。

    如果DNA是依循保留型複製的模式,一代之後應該會有兩個分離密度形成。一個是原來的重的(15N13C),一個是新的輕的(14N12C)。不會有半重半輕的。如果複製是分散式的話,第一代之後固然會產生半重半輕的,但是第二代之後應該是介於半重半輕與全輕之間的分佈,不會分開成半重半輕與全輕兩種分佈。所以Matthew Meselson與Franklin Stahl的結果很明顯地告訴我們DNA的複製模式是半保守型的。

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  • 2 decades ago

    這像是學校實驗或正課的作業!!

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